鰻魚及制品中15種喹諾酮類藥物殘留量測定分析條件的選擇

時間：2023-03-25 02:08:22來源：food欄目：食品快速檢測閱讀：

鰻魚及制品中15種喹諾酮類藥物殘留量測定分析條件的選擇

[db:作者] / 2022-12-19 00:00

11.2.1.7 分析條件的選擇

(1)提取液選擇

喹諾酮類藥物為酸堿兩性物質，其提取方法可分為3種主要類型，-種是在中性條件下用有機溶液萃取，這類藥物也可以在堿性條件下提取，如用氨水乙腈溶液提取，還可以在酸性條件下提取，如采用乙酸乙腈溶液等?；w中的水分對喹諾酮類藥物的提取有影響，本方法曾先后參照文獻，采用了10%氨水乙腈溶液、1%乙酸乙腈溶液及乙腈進行提取，結果發現，對于鰻魚及制品中喹諾酮類藥物的提取，這三種溶劑在提取效率上無明顯差異，本方法選用乙腈作為提取溶劑。由于鰻魚肉質脂質含量較高，在提取時易結團，故需加入無水硫酸鈉。

(2) 凈化條件選擇

酸-堿液液萃取是凈化喹諾酮類藥物的基本方法，如可通過調節pH后采用氯仿等有機溶劑萃取以達到凈化目的。近年來，固相萃取成為動物源性食品中藥物殘留分析的主要凈化方式，有多種商品化固相萃取小柱可以選擇。對于喹諾酮類藥物，有報道采用正相固相萃取小柱如氰基柱、氨基柱及離子交換小柱如羧基柱、苯磺酸柱等。近年來使用較多的凈化方式為將提取溶劑上柱，強陽離子交換小柱凈化、氨水甲醇洗脫。

在試驗中發現若直接采用乙腈提取液上柱,嘔喹酸、萘啶酸及氟甲喹不能完全被固相萃取小柱吸附，因此，在采用乙腈提取后需要將有機相換為乙酸銨溶液過柱凈化以提高回收率。試驗發現，采用甲醇即可較完全洗脫嗯喹酸、萘啶酸與氟甲喹，而對于其他12種喹諾酮類殘留則需要采用氨水甲醇洗脫。在制作了淋洗曲線后，確定了洗脫液先后為1.5mL甲醇、3mL25%氨水甲醇依次洗脫(表11-6)。

表11-6 洗脫液體積與回收率(%)關系

(3)質譜條件優化

采用注射泵直接進樣方式，以8μL/min將15種喹諾酮類藥物的標準溶液分別注入串聯質譜的離子源中。采用正離子掃描方式進行一-級質譜分析，確定了準分子離子峰(M+1)，優化了去集簇電壓。

對被測物的準分子離子碰撞后，進行二級質譜分析，得到子離子質譜圖，優化了碰撞能量，此外，還對離子源溫度、霧化氣、氣簾氣、輔助氣等參數進行了優化。

(4)色譜條件選擇

采用多反應監測模式的液相色譜-串聯質譜儀進行分析時，并不要求各組分在液相色譜上進行完全分離，但由于氟甲喹與咽喹酸兩種物質的相對分子量-致，且豐度最大的子離子亦-致，因而這兩種物質的完全分離尤為重要。本方法選擇了YMC Pack Pro C18柱(150mm×2.1mm，5um)與Agillent ZORBAX Eclipse XDB-C18柱(150mm×4.6mm，5μm)進行了試驗，選擇了洗脫條件，試驗證明，在梯度洗脫條件下這15種物質均能較好分離。

(5)喹諾酮類藥物的穩定性

喹諾酮類藥物較穩定，有資料表明如恩諾沙星、氟甲喹、嗯喹酸、沙拉沙星等藥物在魚皮中濃度含量較高，因而在制樣時考忠到需要將魚皮與魚肉混合勻漿。鑒于鰻魚皮難以攪碎，因而采用微波加熱的方式。本方法試驗了在中高功率(功率為500W)微波加熱30s、1min、1.5min三種條件下喹諾酮類藥物的穩定性，試驗證明，在該功率下，30s與1min的加熱時間不會破壞喹諾酮類藥物的穩定性，同時經加熱后魚皮可以容易地與魚肉一并進行勻漿，故在樣品制備時，采用中高功率加熱30s。

喹諾酮類藥物高濃度的貯備液在甲醇中可保存3個月以上，但水相中低濃度工作液極易降解，應臨用時現配。由于如諾氟沙星等一些喹諾酮類藥物對光不穩定，應避光存放，同時在操作過程中要盡可能使用棕色玻璃器皿。

另外，試驗中還發現氮吹時的溫度對一些喹諾酮類藥物的回收率有影響，溫度過高回收率有所下降，建議濃縮時的溫度不超過40℃。

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